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【解析】
【分析】據圖分析,①表示構建基因表達載體的過程,②表示將目的基因導入受體細胞(大腸桿菌)的過程,③表示目的基因在受體細胞中的表達過程,④表示誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程。
【詳解】A、過程①利用質粒構建表達載體,該過程需要用到限制酶和DNA連接酶,A正確;
B、②表示將目的基因導入受體細胞(大腸桿菌)的過程,不是獲取VP40抗原蛋白所用技術的核心,B錯誤;
C、③表示目的基因在受體細胞中的表達過程,轉錄的產物是mRNA,故為鑒定VP40基因是否成功轉錄,可用分子雜交技術進行鑒定,若出現雜交帶,則證明轉錄成功,C正確;
D、④表示誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的過程,但該過程獲得的雜交瘤細胞不一定是所需的雜交瘤細胞,故對雜交瘤細胞還需進行克隆化培養和專一抗體檢測,最終獲得單克隆抗體,D正確。
故選B。
【分析】
通過與分子量標記比較可知單用EcoRI處理后產生了4kb和6kb兩條帶;而利用EcoRI和NotI雙酶切時產生了6kb、3kb、1kb三條帶,即4kb的片段進一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段,因此DNA含有一個NotI酶切位點,因為用NotI處理只產生了一個10kb的條帶,所以該分子必須是環狀的,長度一定是10kb。據此答題。
【詳解】AB、單用EcoRI處理和利用EcoRI和NotI雙酶切時產生的結果不同,說明DNA含有NotI酶切位點,因為用NotI處理只產生了一個10kb的條帶,所以該分子必須是環狀的,且長度一定是10kb,A正確;B正確;
C、因為用NotI處理只產生了一個10kb的條帶,說明該環狀DNA上含有一個NotI切割位點,單用EcoRI處理后產生了4kb和6kb兩條帶,說明該環狀DNA上含有2個EcoRI切割位點,C正確:
D、用EcoRI處理后產生的4kb的片段,進一步被NotI酶切為3kb和1kb的片段,可以得知NotI切點與EcoRI切點的最短距離為1kb,最大距離為3kb,D錯誤。
故選D。
【點睛】
【分析】目的基因的表達受到受體細胞和環境因素的影響。目的基因轉入受體細胞后,不一定能正常轉錄;即使正常轉錄,也不一定能正常翻譯;即使能正常翻譯,也不一定能形成和在供體細胞中一樣的蛋白質。
【詳解】A、抗除草劑基因轉入某植物獲得轉基因植株,但不抗除草劑,也可能是翻譯后的肽鏈未能正確折疊形成特定的空間結構,A錯誤;
B、限制性核酸內切酶通常能特異性地識別4個或6個核苷酸序列,B錯誤;
C、質粒中的抗生素合抗性基因通常作為標記基因,C錯誤;
D、原核細胞中表達的真核細胞基因,由于原核細胞沒有內質網、高爾基體等細胞器,表達產物與真核細胞中可能不同,D正確。
故選D。
【分析】植物組織培養的原理是植物細胞的全能性,其過程是:離體的植物組織、器官或細胞(外植體)脫分化形成愈傷組織,愈傷組織再分化形成胚狀體,進一步發育植株(新植體)。
【詳解】A、離體的紅豆杉組織細胞通過纖維素酶和果膠酶分散處理后直接進行懸浮培養,A錯誤;
B、懸浮培養液中細胞脫分化形成愈傷組織,大多數細胞在形態上大小相差不大,細胞核-質比率大,胞質濃厚,液泡化程度高,B正確;
C、脫分化過程一般細胞分裂素與生長素含量比值小于1,C錯誤;
D、植物細胞懸浮培養中植物細胞生長沒有接觸抑制,但是受營養物質的影響,不可能無限擴大培養,D錯誤。
故選B。
【分析】“分子手術刀”--限制性核酸內切酶(限制酶)
(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的;
(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性;
(3)結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
由于酶A和C都在質粒標記基因的位置,所以需要用酶B和C同時切割質粒和目的基因。
【詳解】A、質粒中含有2個酶A的酶切位點,所以切割后會產生4個游離的磷酸基團,A錯誤;
B、如果用酶A和C同時切割質粒,會破壞質粒的標記基因,B錯誤;
C、根據B項分析,需要用酶B和C切割質粒和目的基因,導致四環素抗性基因被破壞,所以不能在含四環素的培養基中生長,C錯誤;
D、若用酶B和酶C切割,產生不同的黏性末端,避免質粒自身環化,D正確。
故選D。